其他方法试剂盒
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- 丁酸(butyric acid)ELISA试剂盒-竞争法检测
- 上海恒远生物从事酶联免疫学12年有余,技术成熟,产品稳定。恒远品牌自主研发ELISA试剂盒,现已涵盖20多个种属,数千种产品,涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个研究领域。其ELISA试剂盒不仅检测指标丰富,还可以根据实验需求定制检测范围,并且提供实验外包与免费代测服务。欢迎您来电咨询。
中文名称 |
丁酸(butyric acid)ELISA试剂盒-竞争法检测 |
规格 | 96T |
货号 |
HB142-SH |
价格 | ¥2500 |
种属 |
|
样本类型 | 血清,血浆,组织匀浆,细胞裂解液、细胞培养上清液等 |
检测范围 | 详见说明书 |
灵敏度 | 详见说明书 |
反应时间 | 1-5h |
样本体积 | 10ul |
检测波长 | 450nm |
货期 | 3-5天 |
说明书 | 咨询我司业务员获取 |
文献 |
咨询我司业务员获取 |
使用目的:本试剂盒用于测定样本中丁酸(butyric acid)的含量。
实验原理
本试剂盒应用酶联免疫竞争法测定标本中丁酸(butyric acid)水平。用纯化的丁酸(butyric acid)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入丁酸(butyric acid),和HRP标记的丁酸(butyric acid)抗原,使它们竞争结合,,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。样本颜色的深浅和样品中的丁酸(butyric acid)的含量呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中丁酸(butyric acid)的含量。
操作步骤
1. 加样:分别设标准孔、空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上标准孔中加50微升,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
2. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
7. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
8. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
检测范围:100 ng/L -5000ng/L
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
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