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胎牛血清如何正确存放与解冻,干货记得收藏
Gibco澳洲胎牛血清在科研市场上应用广泛相信大家都知道。但对于胎牛血清的使用及保存，并不是所有人都那么清楚，今天小编就以胎牛血清的储存、常见问题及处理方法进行分析，建议收藏！
一、如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?
未拆封的血清，一般情况下应存放于-10℃至-20℃，在产品规定的效期内均可使用，若一次无法用完一瓶，建议无菌分装血清至合适大小的无菌离心管内，再放回冷冻。
将血清从冷冻冰箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融，或通过水浴锅促使其溶解。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。完全溶解后建议尽快使用，若长时间储存在2-8℃，血清中的各种（脂）蛋白（如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等）可能因凝集而形成沉淀或可见的混浊。
总而言之：血清推荐在-10至-20℃条件储存，并避免反复冻融。
二、血清中絮状沉淀，它们是什么，怎么处理?
1.将冷冻保存的血清取出后，置4℃冰箱静止过夜；
2.待血清融化后，上下颠倒，轻轻混匀，继续4℃2-3小时；
3.轻轻吸取上层血清，分装，余底下50ml左右；
4.低速离心5分钟，去掉沉淀。
若解冻后发现有絮状沉淀物出现，该怎么处理?
胎牛血清中沉淀物的出现有许多种原因，但最普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的变性所造成，而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解冻后，也会存在于胎牛血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物，并不影响胎牛血清本身的质量。若欲去除这些絮状沉淀物，可以将胎牛血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞您的过滤膜。
解冻胎牛血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温)，若胎牛血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃)，实验显示非常容易产生沉淀物。解冻胎牛血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。请勿将胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，胎牛血清会变得混浊，同时胎牛血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响胎牛血清的质量。胎牛血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。若必须做胎牛血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。
三、如何避免血清中产生沉淀?
1.解冻时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一；
2.分装冻存时，须规则摇晃均匀（小心勿造成气泡）；
3.切勿由-20℃直接至37℃水浴锅解冻，较大的温差，易造成蛋白质凝结而发生沉淀；
4.切勿将血清置于37℃过长时间，否则可能使之浑浊，其中一些不稳定的组分也会因此受到影响，最终降低血清的品质；
5.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤；
6.若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且保持摇晃均匀。温度过高、时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。
四、血清中的“黑胶虫”是怎么回事？
在细胞培养的时候，有时会在400倍显微镜下看到小黑点在动，小黑点有时呈点状，有时呈小的片状，运动形式为在原地振动，类似布朗运动，这种小黑点既不是细菌、霉菌，也不是支原体，目前业内人士称其为“黑胶虫”。
黑胶虫究竟是一种生物还是非生物，本身就存在争议。黑胶虫一般是存在血清里的，而血清通常是经过0.1μm滤膜过滤的，所以血清里不可能存在细菌、霉菌及支原体等微生物。如果说黑胶虫不是生物，它会不断增多，达到一定数量时会与细胞竞争性生长，与细胞竞争培养基中的营养，从而使得细胞营养不足而死亡。
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