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人CXC趋化因子配体1(CXCL1)ELISA实验操作手册
趋化因子(C-X-C基序)配体1(CXCL1)是一个小分子量细胞因子,属于CXC趋化因子家族,以前又被称为GRO1致癌基因、GROα、KC和中性粒细胞激活蛋白3(NAP-3)。那么在ELISA实验中有哪些注意事项呢,恒远生物小编为大家总结ELISA实验操作注意事项。
检测范围:
12ng/L - 420ng/L
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中CXC趋化因子配体1(CXCL1)含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人CXC趋化因子配体1(CXCL1)水平。用纯化的人CXC趋化因子配体1(CXCL1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入CXC趋化因子配体1(CXCL1),再与HRP标记的CXC趋化因子配体1(CXCL1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的CXC趋化因子配体1(CXCL1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人CXC趋化因子配体1(CXCL1)浓度。
注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
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