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技术干货:2023ELISA实验重点注意事项
ELISA试剂盒以其灵敏度较高，特异性好的特点已广泛用于科研实验研究，越来越多的科研单位和高校毕业论文都选择用ELISA试剂盒作为研究课题。优质的试剂，优质的仪器和正确的操作方法是保证ELISA试剂盒检验结果准确可靠的必要条件。但在实验中也有很多小细节会影响到实验结果，下面就和大家谈谈实验室中ELISA试剂盒的注意事项。
1.适宜的温度
血清标本宜在新鲜时检测，严重溶血标本禁用。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG聚合，使间接法的试剂本底加深。超过一周测定的需－20℃保存。在建立ELISA方法作反应动力学研究时，实验表明，两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时，产物的生成可达顶峰。为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，反应板不宜叠放，以保证各板的温度都能迅速平衡。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。由于公司的试剂盒温育是在空气浴中完成，采用水浴会造成值偏高或花板。另外温育中还有边缘效应，边上的值会偏高，建议为了客观的判断结果，将质控放在非边缘位置。
2.如何处理
冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存；使用一次性玻璃试管或真空管采血管；并使用非抗凝标本，肝素抗凝血浆会增加OD值，可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关；EDTA、酶抑制剂（如NaN3）可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性。
3.关于采集
血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清，或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
4.有效期
通常在没有开封，有效期为6个月，但根据实验需求，试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。
恒远生物ELISA试剂盒指标推荐：
小鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒
小鼠白介素17A(IL-17A)ELISA试剂盒
小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒
小鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒
人胰岛素（INS)ELISA试剂盒
人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒
人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒
人肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒
大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒
大鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒
大鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒
大鼠激素敏感性脂肪酶（HSL）ELISA试剂盒
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