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生化试剂盒

活性氧(ROS)测定试剂盒(化学荧光法)
恒远生物生化试剂盒应用领域广泛,涉及酶类、氧化应激、铁死亡、肝功能、肾功能、糖酵解、无机盐离子、脂质代谢、植物抗逆性等。检测样本类型丰富,涉及多种体液、组织、细胞、食品、植物、药物、化妆品等。主要的检测仪器为酶标仪,分光光度计和荧光酶标仪。我们将以高度的责任感和出色的产品质量为客户提供高效专业的生化代测服务和实验技术解决方案。丰富的经验、优良的品质、充足的库存、准确的交货时间、极具竞争力的价格,所有这些保证了我们向您提供的最专业最优质的服务。

中文名称

活性氧(ROS)测定试剂盒(化学荧光法)

规格 100T-500T
货号

P-846-SH

价格 ¥700
样本类型 血清,血浆,组织匀浆,细胞裂解液、细胞培养上清液等
检测范围 详见说明书
检测方法

化学荧光法

货期 3-5天
说明书 咨询我司业务员获取
文献 咨询我司业务员获取

    意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

查尔酮异构酶(Chalcone isomerase, CHI)是第一个被认识的黄酮类化合物合成相关酶,也是黄酮代谢途径中的关键酶之一。查尔酮异构酶和查尔酮合酶一起构成了黄酮类化合物生物合成的限速酶。

 

测定原理:

查尔酮异构酶(CHI)催化查尔酮环化形成 4,5,7-三羟基黄烷酮,通过测定381nm下的吸光度变化表示CHI的活性。

 

自备的仪器和用品

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

 

试剂的组成:

提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;用时加入50mL试剂一充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存。

 

粗酶液提取:

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

 

测定步骤

1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至381nm,蒸馏水调零。

2、 样本测定表

在1mL玻璃比色皿中加入50µL上清和950µL试剂二,立即混匀并记录381nm下初始吸光值A1和37℃保温30min后的吸光值A2。计算ΔA=A2-A1。

 

CHI活性计算:

(1) 按样本蛋白浓度计算

单位定义:每mg组织蛋白在每mL反应体系中每小时A381变化0.1为一个酶活力单位。

CHI(U/mg prot)=ΔA×V反总÷(V样×Cpr)÷0.1÷T =400×ΔA÷Cpr

(2)按样本鲜重计算

单位定义:每g组织在每mL反应体系中每小时A381变化0.1为一个酶活力单位。

CHI(U/g 鲜重)=ΔA×V反总÷(W× V样÷V样总)÷0.1÷T =400×ΔA÷W

V反总:反应体系总体积,1mL; V样:加入样本体积,0.05mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,0.5h;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量。


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