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质粒转化实验操作步骤

将质粒 DNA 导入细菌的过程称为转化( Transformation )。此感受态细菌细胞在 CaCl 2 低渗溶液中膨胀为球状。质粒 DNA 与 CaCl 2 形成抗 DNase 羟基 - 磷酸钙复合物黏附于细菌表面,经 42℃ 短时间热冲击处理,促进细胞吸收 DNA 复合物。在丰富培养基上生长数小时后,球状细胞复原并分裂增殖。被转化的细菌中,外源基因得到表达。在选择性培养平板上,可选出所需的转化子(即含有质粒 DNA 的细菌)。

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酶标板整体背景高该如何处理?

近日,有客户咨询公司的业务员,ELISA实验中标板整体背景高有什么好的处理方式吗?下面就请我司技术专员为您答疑!

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ELISA试剂盒灵敏度低?

近日,有客户在做完实验后,反映阳性对照、质控在内的所有板孔颜色均较淡。这是什么原因造成的?我司技术整理后给出如下解析,邀您来看看!

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ELISA实验之“温育”

ELISA(酶联免疫吸附测定)中的温育是一个至关重要的步骤,它直接影响到抗原与抗体在固相表面的结合效率,进而影响整个实验的准确性和可靠性。以下是关于ELISA温育的详细解释:

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质粒转化的操作步骤你知道吗

将质粒 DNA 导入细菌的过程称为转化( Transformation )。此感受态细菌细胞在 CaCl 2 低渗溶液中膨胀为球状(感受态细菌的制备,见前)。质粒 DNA 与 CaCl 2 形成抗 DNase 羟基 - 磷酸钙复合物黏附于细菌表面,经 42℃ 短时间热冲击处理,促进细胞吸收 DNA 复合物。在丰富培养基上生长数小时后,球状细胞复原并分裂增殖。被转化的细菌中,外源基因得到表达。在选择性培养平板上,可选出所需的转化子(即含有质粒 DNA 的细菌)。钙处理的感受态细胞,一般每微克 DNA 能获得 10 5 ~ 10 6 个转化子。除化学方法转化细菌外,还有电穿孔法( Electroporation ),其转化率可高达 10 9 ~ 10 10 个转化子 /μg 质粒 DNA 。

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