生化试剂盒
- 游离脂肪酸含量(FFA)试剂盒-微量法
- 恒远生物生化试剂盒应用领域广泛,涉及酶类、氧化应激、铁死亡、肝功能、肾功能、糖酵解、无机盐离子、脂质代谢、植物抗逆性等。检测样本类型丰富,涉及多种体液、组织、细胞、食品、植物、药物、化妆品等。主要的检测仪器为酶标仪,分光光度计和荧光酶标仪。我们将以高度的责任感和出色的产品质量为客户提供高效专业的生化代测服务和实验技术解决方案。丰富的经验、优良的品质、充足的库存、准确的交货时间、极具竞争力的价格,所有这些保证了我们向您提供的最专业最优质的服务。
中文名称 |
游离脂肪酸含量(FFA)试剂盒 |
规格 | 48样 |
货号 |
L-721-SH |
价格 | ¥580 |
样本类型 | 血清,血浆,组织匀浆,细胞裂解液、细胞培养上清液等 |
检测范围 | 详见说明书 |
检测方法 |
微量法 |
货期 | 3-5天 |
说明书 | 咨询我司业务员获取 |
文献 | 咨询我司业务员获取 |
注 意 :正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
FFA 既是脂肪水解的产物,又是脂肪合成的底物。FFA 的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关,也
可反映食物贮藏中的品质变化。
测定原理:
在弱酸性条件下,FFA 与铜盐反应生成铜皂,在 715nm 处有特征吸收峰,在一定范围内游离脂肪酸含量与显色程度呈线性关系。
自备仪器和用品:
研钵、台式离心机、震荡仪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。
样品中 FFA 提取:
组织用蒸馏水冲洗干净后,用吸水纸吸取表面水分,捣碎后按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)加入试剂一,震荡提取 3h,8000g,4℃离心 10min,取上清液待测。
测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min,调节波长到 715 nm。
2. 对照管:取上清液 0.4mL,加 0.2mL 试剂二,充分震荡 5min,室温静置 5min,取上层 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板,调零。
3. 测定管:取上清液 0.4mL,加 0.2mL 试剂三,充分震荡 5min,室温静置 5min,取上层 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板,测定吸光值,记为 A。
FFA 含量计算:
a. 使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y=0.0075 x+ 0.0055,R2=0.994
(1)按样本蛋白浓度计算
FFA(nmol/mg prot)= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1×Cpr)=133×(A-0.0055)÷Cpr
(2)按样本质量计算
FFA(nmol/g 鲜重)= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1÷V2×W)=133×(A-0.0055)÷W
V1:加入样本体积,0.4mL;V2:提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g。
b.使用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y=0.0038 x+ 0.0055,R2=0.994
(1)按样本蛋白浓度计算
FFA(nmol/mg prot)= (A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1×Cpr)=266×(A-0.0055)÷Cpr
(2)按样本质量计算
FFA(nmol/g 鲜重)= (A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1÷V2×W)=266×(A-0.0055)÷W
V1:加入样本体积,0.4mL;V2:提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g。
注意事项:
1. 蛋白含量不可直接用提取的上清液直接测定,可用蒸馏水或缓冲液或生理盐水选用本公司的 BCA 法蛋白含量测定试剂盒。
2. 最低检出限为 2 nmol/mL。
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