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生化试剂盒

支链淀粉含量试剂盒-微板法
恒远生物生化试剂盒应用领域广泛,涉及酶类、氧化应激、铁死亡、肝功能、肾功能、糖酵解、无机盐离子、脂质代谢、植物抗逆性等。检测样本类型丰富,涉及多种体液、组织、细胞、食品、植物、药物、化妆品等。主要的检测仪器为酶标仪,分光光度计和荧光酶标仪。
我们将以高度的责任感和出色的产品质量为客户提供高效专业的生化代测服务和实验技术解决方案。丰富的经验、优良的品质、充足的库存、准确的交货时间、极具竞争力的价格,所有这些保证了我们向您提供的最专业最优质的服务。
中文名称

支链淀粉含量试剂盒


规格 96样
货号

E-358-SH

价格 ¥1500
样本类型 血清,血浆,组织匀浆,细胞裂解液、细胞培养上清液等
检测范围 详见说明书
检测方法 微板法
货期 3-5天
说明书 咨询我司业务员获取
文献 咨询我司业务员获取


    正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

链淀粉是具有高度分支的多糖,淀粉中直链淀粉和支链淀粉的比例和含量对淀粉产品的加工、物化特性、糊化温度等有着直接的影响,对于不同比例直、支链淀粉的淀粉的研究具有重要的意义。

 

测定原理:

利用80%乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开,利用双波长比色法测定支链淀粉含量。

需自备的仪器和用品:

酶标仪/可见分光光度计、水浴、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰、乙醚和蒸馏水。

 

试剂的组成和配制:

试剂一:液体100mL×1瓶;4℃保存;

试剂二:乙醚100mL×1瓶;4℃保存;(自备)

试剂三:液体100mL×1瓶;4℃保存;

试剂四:液体2mL×1; 4℃保存;

试剂五:液体300uL×1; 4℃保存;

 

淀粉提取: 

称取0.01~0.02g烘干样本(建议称取约0.01g)于研钵中研碎,加入1mL试剂一,充分匀浆后转移到EP管中,80℃水浴提取30min3000g25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入1mL试剂二(乙醚)振荡5min3000g25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入1mL试剂三充分溶解,90℃水浴10min,冷却后待测。

 

测定步骤:

1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上,蒸馏水调零。

测定管:在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20uL样本, 14uL试剂四,120uL蒸馏水,2uL试剂五,44uL蒸馏水,混匀,分别测定550743nm处吸光值,ΔA测定=A550-A743

空白管:在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20uL试剂三, 14uL试剂四,120uL蒸馏水,2uL试剂五,44uL蒸馏水,混匀,分别测定550743nm处吸光值,ΔA空白=A550-A743

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

支链淀粉含量计算:

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y=0.1214x+0.0076x标准品浓度(mg/mL),y吸光

1按照蛋白浓度计算

支链淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA测定-ΔA空白-0.0076V1]÷0.1214 ÷(V1×Cpr)=8.24×A测定-ΔA空白-0.0076) ÷Cpr

2、按样本干重计算

支链淀粉含量(mg/g干重)= [(ΔA测定-ΔA空白-0.0076V1] ÷0.1214÷(W×V1÷V2) =8.24×A测定-ΔA空白-0.0076) ÷W

V1:加入反应体系中样本体积,0.02mLV2:加入提取液体积,1 mLCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样质量,g

 

b. 96孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y= 0.0607x+0.0076;x标准品浓度(mg/mL),y吸光

1按照蛋白浓度计算

支链淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA测定-ΔA空白-0.0076V1]÷0.0607 ÷(V1×Cpr)=16.47×A测定-ΔA空白-0.0076) ÷Cpr

2、按样本干重计算

支链淀粉含量(mg/g干重)= [(ΔA测定-ΔA空白-0.0076V1] ÷0.0607÷(W×V1÷V2) =16.47×A测定-ΔA空白-0.0076) ÷W

V1:加入反应体系中样本体积,0.02mLV2:加入提取液体积,1 mLCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样质量,g

最低检测限为10mg/g干重或0.1mg/mgprot

 

 


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